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  • 簡單介紹一下細胞破碎技術(shù)的機械法類型有哪些?
  • 更新日期:2021-05-24 瀏覽次數(shù):3827
  細胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。 結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,蛋白質(zhì)可以大規(guī)模生產(chǎn)。
 
  細胞破碎技術(shù)的破碎方法可規(guī)納為機械法和非機械法兩大類。下面小編簡單介紹一下細胞破碎技術(shù)的機械法類型,如下所示:
 
  高速攪拌珠研磨破碎法
 
  研磨是常用的一種方法,它將細胞懸浮液與玻璃小珠、石英砂或氧化鋁等研磨劑一起快速攪拌,使細胞獲得破碎。在工業(yè)規(guī)模的破碎中,常采用高速珠磨機 。
 
  超聲波破碎法
 
  超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發(fā)射的15-25kHz的超聲波探頭處理細胞懸浮液。 超聲波振蕩器有不同的類型,常用的為電聲型,它是由發(fā)生器和換能器組成,發(fā)生器能產(chǎn)生高頻電流,換能器的作用是把電磁振蕩轉(zhuǎn)換成機械振動。超聲波振蕩器以可分為槽式和探頭直接插入介質(zhì)兩種型式。
 
  高壓勻漿破碎法
 
  高壓勻漿器是常用的設(shè)備,它由可產(chǎn)生高壓的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出閥(discharge valve)組成,排出閥具有狹窄的小孔,其大小可以調(diào)節(jié)。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內(nèi),在高壓下迫使其在排出閥的小孔中高速沖出,并射向撞擊環(huán)上,由于突然減壓和高速沖擊,使細胞受到高的液相剪切力而破碎。在操作方式上,可以采用單次通過勻漿器或多次循環(huán)通過等方式,也可連續(xù)操作。為了控制溫度的升高,可在進口處用干冰調(diào)節(jié)溫度,使出口溫度調(diào)節(jié)在20℃左右。在工業(yè)規(guī)模的細胞破碎中,對于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長靜止期的細胞。
 
  振蕩珠擊破碎法 
 
  將等體積的小量組織樣品與高密度的ZircoBeads放入可密封的2ml螺旋蓋微量管中,再加入緩沖液與穩(wěn)定成份到1.5ml的體積,用6500RPM振湯機高速上下振動8秒,休息8秒,再振動8秒即可。此方法是目前最快且一次可處理最多樣品的方法。 一臺機器最多可以在一天處理2400支樣品。對小量且多樣的人很方便。
 
  通過以上內(nèi)容,小編希望對大家了解細胞破碎技術(shù)有所幫助。
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