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  • 說一說細(xì)胞破碎常見的幾種非機(jī)械破碎方法
  • 更新日期:2021-06-18 瀏覽次數(shù):7618
  細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù)。細(xì)胞破碎分離提純某一種蛋白質(zhì)時,首先要把蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不喪失活性。所以要采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細(xì)胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細(xì)胞破碎的難易不一,使用的方法也不相同,如動物臟器的細(xì)胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅(jiān)固的纖維素、半纖維素組成的細(xì)胞壁。
 
  下面小編簡單給大家介紹一下細(xì)胞破碎常見的幾種非機(jī)械破碎方法,如下所示:
 
  凍融破碎法
 
  將細(xì)胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,反覆多次而達(dá)到破壁作用。由于冷凍,一方面能使細(xì)胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂,從而增加細(xì)胞的親水性能,另一方面胞內(nèi)水結(jié)晶,形成冰晶粒,引起細(xì)胞膨脹而破裂。對于細(xì)胞壁較脆弱的菌體,可采用此法。
 
  化學(xué)破碎法
 
  采用化學(xué)法處理可以溶解細(xì)胞或抽提胞內(nèi)組分。常用酸、堿、表面活性劑和有機(jī)溶劑等化學(xué)試劑
 
  去垢劑破碎法
 
  滲透壓沖擊破碎法
 
  滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法,將細(xì)胞放在高滲透壓的溶液中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液),由于滲透壓的作用,細(xì)胞內(nèi)水分便向外滲出,細(xì)胞發(fā)生收縮,當(dāng)達(dá)到平衡后,將介質(zhì)快速稀釋,或?qū)⒓?xì)胞轉(zhuǎn)入水或緩沖液中,由于滲透壓的突然變化,胞外的水迅速滲入胞內(nèi),引起細(xì)胞快速膨脹而破裂。
 
  酶溶破碎法
 
  酶解是利用溶解細(xì)胞壁的酶處理菌體細(xì)胞,使細(xì)胞壁受到部分或*破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細(xì)胞膜,進(jìn)一步增大胞內(nèi)產(chǎn)物的通透性。溶菌酶(lysozyme)適用于革蘭氏陽性菌細(xì)胞的分解,應(yīng)用于革蘭氏陰性菌時,需輔以EDTA使之更有效地作用于細(xì)胞壁。 真核細(xì)胞的細(xì)胞壁不同于原核細(xì)胞,需采用不同的酶。
 
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